Combined SRPK and AKT Pharmacological Inhibition Is Synergistic In T-Cell Acute Lymphoblastic Leukemia Cells

Combined SRPK and AKT Pharmacological Inhibition Is Synergistic In T-Cell Acute Lymphoblastic Leukemia Cells

O artigo selecionado para apresentação, como parte das atividades avaliativas da disciplina SAU052, foi realizado por pesquisadores da Universidade Federal de Viçosa e avaliou os efeitos de tratamentos combinados entre inibidores farmacológicos das proteínas quinases de serina/arginina (SRPK) e outras quinases a jusante da ativação de EGFR em células de leucemia. A leucemia linfoblástica aguda de células T (T-ALL) é um câncer frequente, porém o prognóstico da doença, a cura e/ou prevenção de recidivas, ainda é pouco conhecido. Devido as limitações nas possibilidades de tratamento e controle da leucemia, estudos envolvendo novos esquemas terapêuticos in vitro torna-se grande relevância.

Estudo realizado por Jang et al. (2008), como células T-ALL demonstrou a correlação entre a superexpressão de SRPK e o aumento da proliferação celular através da transcrição de ciclina A1 aumentada. Corroborando com esses achados, Batson et al. (2017), Hatcher et al. (2018) e Moreira et al. (2018) buscou identificar pequenas moléculas capazes de inibir a atividade celular de SRPK. A metodologia utilizada pelos autores do presente artigo, SIQUEIRA et al. (2020), foi baseada na realização de cultura de células e uma análise criteriosa da eficácia da aplicação de esquemas terapêuticos combinados. As etapas metodologias foram as seguintes: 1) cultura celular – foi utilizado linhagens de células leucêmicas humanas Jurkat, CCRF-CEM, TALL-1 e HL60 (leucemia mielóide aguda), fibroblasto murino NIH3T3, cardiomioblastos de rato H9c2 e rim de macaco verde africano (VERO).

O cultivo foi em meio RPMI-1640 ou DMEM, suplementado com 10% de soro fetal bovino e 3 mM de L-glutamina, 100 U/mL de penicilina e 100 ÿg/mL de estreptomicina, a 37°C, sob atmosfera umidificada e 5% de CO2; 2) drogas utilizadas: foram adquiridos GDC-0994 e GSK-2118436, GSK 690693 e PIK-294 e compostos foram sintetizados; 3) análise da viabilidade celular – foi realizada por ensaio MTT; 4) obtenção de combinação (CI) – foi realizado pelo métodos Chou-talaly; 5) Westem blotting; 6) análise da apoptose e do ciclo das células jurkat. Os resultados do artigo sugerem que os tratamentos selecionados promoveram a inibição da sinalização do fator de crescimento epidérmico (EGFR), além de favorecer a expressão de splicing, ou seja, o processo de maturação de um pré-mRNA relacionadas ao câncer.

Os ensaios de citotoxicidade exibiram combinações sinérgicas no combate das linhagens celulares de leucemia linfóide. A combinação iSRPK/iAKT a de maior relevância, pois esta diminuiu a hiperfosforilação de proteínas envolvidas no splicing de RNA (SR) e outros alvos relacionados a via EGFR. Além disso, o sinergismo da combinação pode ser associado ao desencadeamento de apoptose celular. Por fim, os achados sugerem que esta combinação de inibição de SRPK-AKT pode ser sinérgica e considerada em estudos futuros envolvendo a leucemia linfoblástica aguda de células T e outros tipos de câncer.

Autores: Simone de Oliveira Santos e Thiago Donizeth da Silva

Revisão e responsável da disciplina: Graziela Domingues de Almeida Lima

Coordenação do projeto de extensão: Juciano Gasparotto

Referências

JANG, SW, et al. 2008. Serina/arginina proteína quinase 2 específica promove a proliferação de células de leucemia por fosforilação de ácinos e regulação de ciclina A1. Câncer Res. 68, 4559-4570. https://doi.org/
10.1158/0008-5472.CAN-08-0021.

BATSON, J., et al. 2017. Desenvolvimento de inibidores potentes e seletivos de SRPK1 como potencial tópico Terapêutica para Doenças Oculares Neovasculares. ACS Química. Biol. 12, 825-832.
https://doi.org/10.1021/acschembio. 6b01048.
HATCHER, JM, et al. 2018. SRPKIN-1: um inibidor covalente de SRPK1/2 que converte potentemente VEGF de isoforma pró-angiogênica para anti-angiogênica. Célula Química. Biol. https://doi. org/10.1016/j.chembiol.2018.01.013.
MOREIRA, GA. et al. 2018. Efeito antimetastático da inibição farmacológica de proteínas quinases ricas em serina/arginina (SRPK) em melanoma murino. Toxicol. Aplic. Pharmacol. 356, 214-223. https://doi.org/10.1016/j.taap.2018.08.012.
SIQUEIRA, RP, et al. 2017. Trifluorometil arilamidas com efeito antileucêmico e atividade inibitória intracelular sobre proteínas quinases ricas em serina/arginina (SRPK). EUR. J. Med. Química 134. https://doi.org/10.1016/j.ejmech.2017.03.078.
SIQUEIRA, RP. et al. 2020. Combined SRPK and AKT pharmacological inhibition is synergistic in T-cell acute lymphoblastic leukemia cells. Toxicology in vitro, v. 65, p. 104777. https://doi.org/10.1016/j.tiv.2020.104777.